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Elisa試劑盒的處理標本需要滿足哪些要求?

日期:2025-06-16 07:42
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摘要:
  Elisa試劑盒利用一對能夠結合于靶蛋白上至少兩個不同位點的抗體。捕獲抗體預包被于微孔板的微孔表面,并與靶蛋白選擇性結合。清洗后,加入檢測抗體,連接到靶蛋白的二位點,形成夾心復合物。
 
  Elisa試劑盒的標本要求:
 
  1. 血清::溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
 
  2. 血漿:根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
 
  3. 尿液:無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
 
  4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
 
  5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑,用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
 
  ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
 
  ①標本因素;
 
  ②試劑因素;
 
  ③操作因素。
 
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