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ELISA實驗技術(shù)問答分享

日期:2025-06-15 23:47
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摘要:1. ELISA實驗中,檢測計算抗原的濃度,臨界值怎么確定? 答:根據(jù)曲線測定的濃度,建議落在標準曲線的中間位置較好,限不要超過標準曲線的上下限,如果超出較多,會影響計算結(jié)果準確性,建議調(diào)整稀釋比例。 2.加完終止液之后測的幾次數(shù)據(jù)差別也蠻大,是什么原因? 答:加完終止液后,顯色反應也不是永遠停止,形成的黃色顏色會隨著時間延長繼續(xù)加深,建議在15 min內(nèi)讀數(shù)。 3.樣本總是在標準曲線之外,稀釋100倍也是,怎么辦? 答:在設置稀釋倍數(shù)之,需要參考相關(guān)文獻,對于一些表達高的蛋白,確實會出現(xiàn)這種情況,之小編接到過的案例,樣品需要稀釋10000倍,目的蛋白才落在檢測區(qū)間內(nèi)。建議繼續(xù)提高稀釋比例。
1. ELISA實驗中,檢測計算抗原的濃度,臨界值怎么確定?
答:根據(jù)曲線測定的濃度,建議落在標準曲線的中間位置較好,限不要超過標準曲線的上下限,如果超出較多,會影響計算結(jié)果準確性,建議調(diào)整稀釋比例。
2.加完終止液之后測的幾次數(shù)據(jù)差別也蠻大,是什么原因?
答:加完終止液后,顯色反應也不是永遠停止,形成的黃色顏色會隨著時間延長繼續(xù)加深,建議在15 min內(nèi)讀數(shù)。
3.樣本總是在標準曲線之外,稀釋100倍也是,怎么辦?
答:在設置稀釋倍數(shù)之,需要參考相關(guān)文獻,對于一些表達高的蛋白,確實會出現(xiàn)這種情況,之小編接到過的案例,樣品需要稀釋10000倍,目的蛋白才落在檢測區(qū)間內(nèi)。建議繼續(xù)提高稀釋比例。
4.試劑盒里面有捕獲抗體么?
答:即用型ELISA試劑盒中,捕獲抗體已經(jīng)預包被至試劑盒中的ELISA板上,沒有單獨的捕獲抗體提供,直接使用ELISA板孵育稀釋后的樣本及標準品即可。非即用型的ELISA試劑盒會有捕獲抗體提供,需按照說明書推薦的工作濃度,用稀釋液稀釋后自行包被。
通蔚生物主營范圍:科研細胞,ELISA試劑盒,生物試劑,細胞培養(yǎng),血清,免疫組化抗體,一抗,二抗,單克隆和多克隆抗體等一系列供學校、醫(yī)學院、研究所等單位科研實驗用的科研產(chǎn)品,本公司專業(yè)代理國內(nèi)外品牌生命科學試劑產(chǎn)品,產(chǎn)品范圍涉及細胞生物學,分子生物學,免疫學及生物化學等實驗室科學研究試劑。

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