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ELISA試劑盒樣本的處理方式及保存注意事項

日期:2025-06-15 23:56
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摘要:ELISA試劑盒樣本的處理方式: 1、組織提取液、肺泡灌洗液等,采集后離心分離,800-1000rmpx5min,取上清,-20C或4°C保存備用; 2、胃液、唾液、尿液的采集方式一般現采現用,胃液、唾液一般采集時間是空腹采集,一般隔夜尿不采集; 3、采集血清時,一股要加入總體積1%的抗凝劑,采集后先室溫或4C靜置半小時后,800-1000rmpx5min分離,取上清,-20C或4C保存備用; 4、采集血漿時一般不加抗凝劑,采集后立即離心800-1000rmpx5min分離,取上清,-20°C或4C保存備用; 5、不貼壁細胞(分泌性蛋白),將培養基和細胞轉移至10ml離心管,500...
ELISA試劑盒樣本的處理方式:
1、組織提取液、肺泡灌洗液等,采集后離心分離,800-1000rmpx5min,取上清,-20C或4°C保存備用;
2、胃液、唾液、尿液的采集方式一般現采現用,胃液、唾液一般采集時間是空腹采集,一般隔夜尿不采集;
3、采集血清時,一股要加入總體積1%的抗凝劑,采集后先室溫或4C靜置半小時后,800-1000rmpx5min分離,取上清,-20C或4C保存備用;
4、采集血漿時一般不加抗凝劑,采集后立即離心800-1000rmpx5min分離,取上清,-20°C或4C保存備用;
5、不貼壁細胞(分泌性蛋白),將培養基和細胞轉移至10ml離心管,500-800rmpx10min,吸取上清至另一10ml離心管中,10000rmpx10min,-20C或4°C保存,作為標本進行檢測,如有需要可進行透析或純化處理。
ELISA試劑盒保存注意事項:
1、要注意避免出現嚴重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,因此,在以RP為標記酶的ELISA測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應顯色。
2、樣本的采集及血消分離中要注意盡里避免污染,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產生分解作用;二則一些內源性酶如大腸桿菌的-半乳糖苷酶本身會對用相應酶作標記的測定方法產生非特異性干擾。
3、血清標本如是以無菌操作分離,則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應在-70C以下。
4、冰凍保存的血清標本須注意避免因停電等造成的反復凍融。標本的反復凍融所產生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子產生破壞作用,從而引起假陰性結果。此外,凍融標本的混勻亦應注意,不要進行劇烈振蕩,反復顛倒混勻即可。
5、標本在保存中如出現污染所致的混濁或絮狀物時,應離心沉淀后取上清檢測。

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