人白細(xì)胞介素 -8（IL -8）ELISA 試劑盒的原理是基于抗原抗體的特異性免疫反應(yīng)，具體如下：

1. 包被：將針對(duì)人 IL -8 的特異性抗體（捕獲抗體）預(yù)先包被在酶標(biāo)板的孔中。這種包被過(guò)程使得抗體能夠牢固地結(jié)合在孔壁上，等待與樣本中的 IL -8 抗原結(jié)合。

2. 加樣：將待檢測(cè)的樣本（如血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液等）加入到包被有抗體的酶標(biāo)板孔中。樣本中的 IL -8 抗原會(huì)特異性地與包被在孔壁上的捕獲抗體結(jié)合，形成抗原 - 抗體復(fù)合物。同時(shí)，試劑盒通常會(huì)提供一系列已知濃度的 IL -8 標(biāo)準(zhǔn)品，與樣本一起進(jìn)行檢測(cè)，用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

3. 洗滌：在樣本與捕獲抗體充分結(jié)合后，需要進(jìn)行洗滌步驟。通過(guò)洗滌，可以去除未結(jié)合的雜質(zhì)、血清蛋白等其他無(wú)關(guān)物質(zhì)，以減少非特異性反應(yīng)，確保后續(xù)檢測(cè)的準(zhǔn)確性。

4. 加酶標(biāo)抗體：洗滌完成后，向孔中加入酶標(biāo)記的抗 IL -8 抗體（檢測(cè)抗體）。這種酶標(biāo)抗體能夠特異性地識(shí)別并結(jié)合已經(jīng)與捕獲抗體結(jié)合的 IL -8 抗原，形成 “捕獲抗體 -IL -8 抗原 - 酶標(biāo)抗體” 的三明治結(jié)構(gòu)。

5. 再次洗滌：加入酶標(biāo)抗體反應(yīng)一段時(shí)間后，再次進(jìn)行洗滌，以去除未結(jié)合的酶標(biāo)抗體，避免其對(duì)后續(xù)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生干擾。

6. 顯色：洗滌結(jié)束后，向孔中加入底物溶液。酶標(biāo)抗體上標(biāo)記的酶會(huì)催化底物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生顏色變化。顏色的深淺與樣本中 IL -8 的含量成正比關(guān)系，即樣本中 IL -8 的濃度越高，產(chǎn)生的顏色越深。

7. 測(cè)定：使用酶標(biāo)儀測(cè)定酶標(biāo)板各孔在特定波長(zhǎng)下的吸光度值。通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度值進(jìn)行比較，并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，就可以計(jì)算出樣本中 IL -8 的濃度。

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