葡萄糖6磷酸酶(G6P)測(cè)試盒
測(cè)定方法:   微量法
測(cè)定規(guī)格:   100管/96樣
保存條件:   低溫避光保存
有 效 期:    6個(gè)月
注   意 :    測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意義:
葡萄糖-6-磷酸酶((glucose 6 phosphatase,G6Pase,EC 3.1.3.9)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和細(xì)胞中,是糖異生過(guò)程水解葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖的限制酶,在保證的動(dòng)態(tài)平衡方面起著重要的作用。

測(cè)定原理:
G6P 催化葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖,變旋酶和葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步依次催化 NAD+還原生成 NADH,在 340nm 下測(cè)定 NADH 生成速率,即可反映 G6P 活性。

需自備的儀器和用品:
分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研缽、冰和蒸餾水。

樣本的前處理:
1、培養(yǎng)細(xì)胞:先收集或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)或細(xì)胞加入1mL提取液),超聲波破碎或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
3、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。