測定方法:    微量法
測定規格:    100T/96S
保存條件:    低溫避光保存
有 效 期:     6個月
注    意:      正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義:

血清鐵是指血液中轉鐵蛋白所結合的鐵。

測定原理:

亞硫酸鈉還原血清Fe3+生成成Fe2+,Fe2+進一步與2, 2’- 聯吡啶顯色,在520nm處有吸收峰,測定該波長光吸收值即可計算血清鐵含量。

自備儀器和用品:

離心機、可調式移液槍、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、冰醋酸、氯仿和蒸餾水。

測定:

1. 分光光度計/酶標儀預熱30 min,調節波長到520 nm,蒸餾水調零。
2. 標準液解凍:提前取出標準液,置于室溫下充分解凍后混勻。
3. 空白管:取EP管,依次加入125 μL蒸餾水,125 μL試劑一,125 μL試劑二,混勻后蓋緊,置于沸水浴5min,自來水冷卻。加入62 μL氯仿(自備),充分震蕩混勻;室溫10000rpm,離心10min,小心吸取上層液210 μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于520 nm測定吸光度,記為A空白管。
4. 標準管:取EP管,依次加入125 μL標準液,125 μL試劑一,125 μL試劑二,混勻后蓋緊,置于沸水浴5min,自來水冷卻。加入62 μL氯仿,充分震蕩混勻;室溫10000rpm,離心10min,小心吸取上層液210 μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于520 nm測定吸光度,記為A標準管。
5. 測定管:取EP管,依次加入125 μL血清,125 μL試劑一,125 μL試劑二,混勻后蓋緊,置于沸水浴5min,自來水冷卻。加入62 μL氯仿,充分震蕩混勻;室溫10000rpm,離心10min,小心吸取上層液210 μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于520 nm測定吸光度,記為A測定管。
注意:空白管和標準管只需測定一次。