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產品詳情
  • 產品名稱:SPEEDYPURE快速質粒大提試劑盒

  • 產品型號: 25T
  • 產品廠商:通蔚生物
  • 產品價格:1610
  • 產品庫存:148
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簡單介紹:
SPEEDYPURE快速質粒大提試劑盒本試劑盒用于質粒 DNA 的小量快速制備。在經典堿裂解法提取質粒的基礎上進行改 進優化,可視化操作,可在 10 min 之內完成提取任務,大大降低了提取時間。質粒可從 菌體中快速釋放,并特異、高效地被離心吸附柱吸附。所得質粒可直接用于酶切、轉化、 PCR 、實時熒光定量,測序等各種分子生物學實驗。
詳情介紹:


SPEEDYPURE快速質粒大提試劑盒

產品及特點
試劑盒用于質粒 DNA 的小量快速制備。在經典堿裂解法提取質粒的基礎上進行改 進優化,可視化操作,可在 10 min 之內完成提取任務,大大降低了提取時間。質粒可從 菌體中快速釋放,并特異、高效地被離心吸附柱吸附。所得質粒可直接用于酶切、轉化、 PCR 、實時熒光定量,測序等各種分子生物學實驗。

它具有下列特點:
1. 快捷、高效:可視化操作,簡便高效,節約時間;
2. 純度高:沉淀致密,去雜干凈。


成分規格

Buffer S1(紫紅色)

20ml

100ml

250ml

Buffer EB

10ml

30ml

60ml

Buffer S2

20ml

100ml

250ml

Buffer S5

20ml

100ml

250ml

Buffer W2(concentrate)

15ml

60ml

2×60ml

RNase A (10 mg/ml)

200μl

1ml

2.5ml

MaxiSpin Columns

2個

10個

25個

Collection Tubes 50 ml

4個

20個

50個

注意:使用前將全部 RNase A 溶液加到 Buffer S1中混合均勻,2 - 8℃保存 ; 按要求在 Buffer W2中加入無水乙醇

本產品僅供科研使用,不得用于其它用途

保存條件
在室溫(15-25℃)干燥條件下,可保存 12 個月;更長時間的保存可置于2-8℃ 。若溶液產生沉淀,應在使用前置于37℃下溶解沉淀。加入 RNase A 后的 Buffer S1 應置于 2-8℃ 保存,可穩定保存 6 個月。

使用方法
1. 取 100 ml-200 ml 過夜培養的菌液,室溫 8000-10,000 rpm 離心2 min,盡量將上清去除干凈。
2. 加入 10 ml Buffer S1,旋渦震蕩或用移液器充分吹打使菌體重懸均勻,呈現出均勻混濁的棕紅色。
注 意:菌體沉淀一定要懸浮均勻,如有未徹底懸浮的菌塊會影響裂解,導致提取的質粒濃度及純度降低)
3. 加入 10 ml Buffer S2,溫和顛倒混勻使菌體完全裂解,直到溶液變成清亮、粘稠的紫紅色。
注 意:不可劇烈震蕩,以免造成基因組 DNA 片段的污染)
4. 加入 8 ml Buffer S5,立即溫和顛倒混勻,可見紅黃相間的沉淀物產生,繼續混勻直到完全變為黃色,再加入 2 ml 無水乙醇,混勻,然后 8000-10,000 rpm離心10 min。
注 意:Buffer S5 加入后應立即混合,避免產生局部沉淀,如果上清中還有紫色漂浮物,說明復性不充分,繼續混勻至溶液顏色完全變為澄清的黃色)
5. 小心將上清液轉移到離心吸附柱中,8000-10,000 rpm 離心1 min,棄收集管中濾液。(注 意:吸附柱的大容量是 15ml,分多次加入)
6. 加入 10ml Buffer W2,8000-10,000 rpm 離心 2 min,棄收集管中濾液。
注 意:Buffer W2 為濃縮液,按要求加入無水乙醇,用后應立即蓋緊瓶蓋,以防酒精揮發)
7. 將吸附柱置于一新的 50 ml 離心管中,加入 1-3 ml 的洗脫液Buffer EB,室溫8000-10,000 rpm離心2 min,離心管底溶液即質粒DNA。

注意事項
1. xi菌培養時間一般為 12 - 16 小時,如接種量大則應減少培養時間,過度培養會降低質 粒質量甚至導致質粒 DNA 突變。
2. 每次使用時都要注意 Buffer S2 和 S5 是否形成沉淀,如有沉淀37℃溶解后再用。
3. 質粒的產量跟xi菌量、質粒拷貝數、質粒大小和操作規范程度密切相關。
SPEEDYPURE快速質粒大提試劑盒
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