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簡單介紹：

2×Taq Plus PCR MasterMix(不含染料) 本產品包含 Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR 反應增強劑、優化劑以及穩定劑，濃度為 2×。具有快速簡便、靈敏度高、特異性強、穩定性好等優點，可大限度地減少人為誤差。

詳情介紹：

2×Taq Plus PCR MasterMix(不含染料)

產品特點

本產品包含 Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR 反應增強劑、優化劑以及穩定劑，濃度為 2×。具有快速簡便、靈敏度高、特異性強、穩定性好等優點，可大限度地減少人為誤差。

它具有下列特點：

1. 顯著提高 PCR 反應的特異性和靈敏度，還能有效擴增GC含量高二級結構等復雜模板。

2. 多次凍融或長期放于 4℃不會影響活性；

3. 應用簡便，減少誤差，降低了對 PCR 條件的要求；

4. 含染料的 MasterMix 產品在 PCR 結束后可以直接上樣電泳。

成分規格

使用方法

（注意：以下舉例為常規PCR體系和反應條件，實際操作中應根據模板、引物結構和目的片段大小不同進行相應的調整和優化）

1. PCR體系
推薦反應體系(25μl)

試劑

用量

模板ＤＮＡ

＜1ug

Primer1(10μM)

0.5μl

Primer2(10μM)

0.5μl

2×Taq Plus PCR MasterMix

12.5μl

ddH2O

Up to 25μl

（注意：引物濃度請以終濃度 0.1 - 1.0 uM 作為設定范圍的參考。擴增效率不高的情況下，可提高引物的濃度；發生非特異性反應時，可降低引物濃度，由此優化反應體系）

2. PCR程序

過程

溫度

時間

預變性

94℃

2min

25－35cycles

變性

94℃

30sec

退火

55-65℃

30sec

延伸

72℃

1kb/30sec

終延伸

72℃

2min

注意：

A 一般實驗中退火溫度比擴增引物的熔解溫度 Tm 低 5℃，無法得到理想的擴增效率時，適當降低退火溫度；發生非特異性反應時，提高退火溫度，由此優化反應條件。

B 延伸時間應根據所擴增片段大小設定，Taq DNA Polymerase的擴增效率為1kb/30 sec。

C 可根據擴增產物的下游應用設定循環數。如果循環次數太少，擴增量不足；如果循環次數太多，錯配機率會增加，非特異性背景嚴重。所以，在保證產物得率的前提下，應盡量減少循環次數）

3. 結果檢測

反應結束后取5μl反應產物，加入適量上樣緩沖液（含染料的不用加），然后進行瓊脂糖凝膠電泳檢測。

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