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產品詳情
  • 產品名稱: Multiplex PCR Kit

  • 產品型號: 100次×20ul
  • 產品廠商:通蔚生物
  • 產品價格:460
  • 產品庫存:116
  • 產品文檔:
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簡單介紹:
Multiplex PCR Kit多重 PCR 是指在單個 PCR 反應中同時對多個基因座位進行擴增的PCR技術,操作步驟和普通 PCR 相同,但可同時檢測多個片段,在科學研究和疾-病診斷等多個領域有重要意義。本試劑盒含有多重 PCR 專用熱啟動 DNA 聚合酶Multiplex DNAPolymerase,具有極高的擴增特異性和靈敏度。配合針對多重 PCR 反應深度優化的專用緩沖液5×Multiplex Buffer,特別適用于微量樣本的多位點檢測。
詳情介紹:

產品特點
多重 PCR 是指在單個 PCR 反應中同時對多個基因座位進行擴增的PCR技術,操作步驟和普通 PCR 相同,但可同時檢測多個片段,在科學研究和疾-病診斷等多個領域有重要意義。本試劑盒含有多重 PCR 專用熱啟動 DNA 聚合酶Multiplex DNAPolymerase,具有極高的擴增特異性和靈敏度。配合針對多重 PCR 反應深度優化的專用緩沖液5×Multiplex Buffer,特別適用于微量樣本的多位點檢測。

它具有以下特點:
1. 適用范圍廣,可以高效地完成絕大多數多重 PCR 檢測;
2. 擴增穩定,可以大程度地減少反應體系優化步驟;
3. 擴增緩沖高度優化,較大程度上抑制非特異性擴增。
4. 單獨的鎂離子成分,可根據實驗需求自行調整。

成份規格

產品組成

規格

5×Multiplex Buffer(無 MgCl2)

210μl / 420μl

Multiplex DNA Polymerase

60μl / 110μl

dNTP(10mM)

30μl /60μl

MgCl2(25mM)

60μl / 120μl

-20℃保存一年

本產品僅供科研使用 ,不得用于其它用


使用方法
注 意:以下舉例推薦PCR體系和反應條件,實際操作中應根據模板、引物結構和目的片段大小不同進行相應的調整和優化)
1.PCR體系推薦反應體系(20μl)

試劑

用量

模板 DNA

< 1μg

Primer mix (10 μM each)

0.5μl

5×Multiplex Buffe(無MgCl2)

4μl

Multiplex DNA Polymerase

1μl

MgCl2(25mM)

 1μl

dNTP(10mM)

0.5μl

ddH2O

Up to 20μl


注 意:
推薦引物反應終濃度為每條引物 0.1 μM,可在 0.05 - 0.4 μM 之間調整。MgCl2終濃度可在 1.0 - 4.0 mM之間調整。
2. PCR 反應程序

過程

溫度

時間

預變性

95℃

5min

2535cycles

變性

95℃

30sec

退火

60

30sec

延伸

72℃

60sec/kb

后延伸

72℃

5min


注意:
A. 多數情況下,使用默認退火溫度即可。如擴增效果不佳,可通過設置退火溫度梯度實驗來摸索適退火溫度。
B. 預變性時間為 5 min,用于充分釋放酶活。請勿降低溫度或縮短時間。
C. 對于低拷貝模板、長片段或者擴增片段較多的情況,可延長退火時間至 3 min 以提高擴增效率。
D. 延伸時間以長片段為準設定。適度延長延伸時間有助于提高擴增產量且有利于困難模板擴增。延伸時間過長可能會導致非特異性擴增增多。
E. 擴增微量樣本時,可通過增加循環數提高擴增產物量。循環數過多可能會導致非特異性擴增增多。
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