易錯 PCR 是在采用 DNA 聚合酶進行目的基因擴增時，通過調整反應條件來改變擴增過程中的突變頻率，從而以一定的頻率向目的基因中隨機引入突變，獲得蛋白質分子的隨機突變體。其關鍵在于對合適突變頻率的選擇，突變頻率太高會導致絕大多數突變為有害突變，無法篩選到有益突變；突變頻率太低則會導致文庫中全是野生型群體。本產品基于以上原理研制。
它具有下列特點：
1. 操作簡便；
2. 突變沒有趨向性，突變率穩定，突變率為 0.66%；
3. 本產品只適用于擴增 1kb 以下的產物，對于1kb 以上的產物，建議分段擴增。
4. 可用于連續易錯 PCR（sequential error-prone PCR）。
成分規格
保存條件
|
試劑 |
用量 |
|
模板 DNA |
10－100ng |
|
Primer F (10 μM) |
1μl |
|
PrimerＲ(10 μM) |
1μl |
|
2× Error Prone PCR Mix |
15μl |
|
10× MnCl2 |
3μl |
|
ddH2O |
Up to 30μl |
過程
溫度
時間
預變性
94℃
3min
30－60cycles
變性
94℃
30sec
退火
45℃
30sec
延伸
72℃
1min/kb